银屑病中细胞凋亡相关基因bcl-2、Fas、bax的检测

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银屑病中细胞凋亡相关基因bcl-2、Fas、bax的检测

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【内容提要】

摘要为了探讨细胞凋亡相关基因bcl-2、Fas、bax在银屑病发病中的意义，采用免疫组化ABC法、SABC法检测了这几种基因在15例银屑病组织中的表达。结果发现银屑病的角质形成细胞中抑凋亡基因bcl-2几乎不表达，促凋亡基因Fas、bax阳性表达。提示促凋亡基因Fas、bax在银屑病中发病起重要作用，而抑凋亡基因bcl-2作用可能不大。
　　银屑病的发病机理尚不明确，角质形成细胞异常增生和角化不全是银屑病的主要摘自病理改变，以往对这方面的研究主要集中在免疫学和生化学方面。近年来银屑病与细胞凋亡的关系逐渐受到越来越多学者的重视。国外有学者报道银屑病表皮中角质形成细胞凋亡异常增多。抑凋亡基因bcl-2和促凋亡基因Fas、bax是现今研究较多、较重要的几个细胞凋亡相关基因。为了探讨这几种基因在银屑病发病中的意义，我们采用免疫组化方法检测了银屑病中细胞凋亡相关基因bcl-2、Fas及bax。
　　1 材料和方法
　　1．1标本来源：采用1994-1997年我院保存的石蜡包埋组织块。寻常型银屑病15例，其中男8例，女例；年龄11-68岁，平均年龄 29.13岁；均为进行期银屑病。6名正常人皮肤组织，皆取自皮肤外科行重睑术、面部美容切除术者的皮肤，石蜡包埋作为对照组。测定前先将石蜡包埋组织块作常规组织切片及HE染色，在光镜下核对诊断，证实其病理诊断无误方采用。
　　1．2试剂：鼠抗人bcl-2单克隆抗体购自Dako公司，生物素化羊抗鼠单克隆抗体系华美生物制品公司产品。兔抗人Fas多抗、兔抗人bax多抗及链酶亲和素-生物素-过氧化酶复合物免疫组化试剂盒（简称SABC试剂盒）均购自武汉博士德生物工程公司。
　　1．3方法：载玻片用APES处理后干燥备用，切取4-5μm厚的石蜡切片，常规脱蜡水化。Bcl-2基因的检测参照ABC法稍加改进，阳性对照为正常淋巴……

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